Kurt Weising, Hilde Nybom, Kirsten Wolff and Günter Kahl, 2005.

DNA Fingerprinting in Plants: Principles, Methods and Applications (2^nd ed.). CRC Press, Taylor & Francis Group, 444 pág., ISBN 0-8493-1488-7. Preço: 101,75 €

 

DNA Fingerprinting in Plants: Principles, Methods and Applications, agora na sua 2ª edição totalmente revista, actualizada e ampliada, é um manual de referência fundamental para os interessados nesta área.

O livro está organizado em nove Capítulos e apresenta, de maneira clara e objectiva, várias técnicas de marcadores moleculares, das mais simples às mais complexas, adequadas à análise de fingerprinting do DNA nas plantas, descrevendo os protocolos passo a passo, discutindo os aspectos técnicos e modificações introduzidas, a influência dos componentes e as condições das reacções e a análise dos resultados.

Os Autores também incluem neste livro 1623 referências de artigos científicos com estudos sobre a aplicação e importância dos métodos e uma listagem dos programas de computador utilizados para avaliação de dados moleculares.

O primeiro Capítulo "Repetitive DNA: An Importante Source of Variation in Eukaryotic Genomes" começa por referir a organização dos três genomas presentes em plantas e apresenta de seguida, como fontes importantes da variação do DNA, a biologia dos microsatélites, dos minisatélites e dos elementos transponíveis.

O Capítulo 2 "Detecting DNA Variation by Molecular Markers" incide sobre as estratégias utilizadas para detectar polimorfismos através de métodos electroforéticos. Cada secção deste Capítulo começa com uma breve introdução sobre os princípios e desenvolvimento histórico da respectiva metodologia, que é seguida de uma descrição das propriedades, vantagens, desvantagens e áreas de aplicação do referido marcador molecular.

O terceiro Capítulo "Laboratory Equipment" enumera o equipamento necessário ao desenvolvimento das várias metodologias, baseadas quer na reacção em cadeia da polimerase (PCR) quer em reacções de hibridação.

O Capítulo 4 "Methodology" surge no seguimento do anterior. Começa por apresentar as recomendações de segurança e protecção do utilizador, agrupadas num conjunto de informações essenciais para se ter num laboratório. A secção seguinte foi elaborada de forma a disponibilizar informações relevantes sobre a recolha e armazenamento de material vegetal, extracção, purificação e quantificação de DNA com descrição pormenorizada de vários protocolos. Nas secções seguintes estão disponíveis protocolos simples e gerais, designadamente para a digestão de DNA com enzimas de restrição, electroforese e revelação de géis de agarose e poliacrilamida, hibridação de sondas, PCR, microsatélites, AFLP, com breves comentários que permitem contornar problemas que inevitavelmente aparecem na bancada.

No Capítulo 5 "Evaluation of Molecular Marker Data" são descritos vários caminhos a seguir na interpretação e análise de dados eletroforéticos em estudos de identificação de genótipos, de avaliação da diversidade genética e análises de segregação e ligação para mapeamento genético.

Nos sexto e sétimo Capítulos, os Autores apresentam vários exemplos de aplicação de fingerprinting de DNA em plantas, especialmente na identificação de genótipos, genética de populações, sistemática, filogeografia e mapeamento genético.

No Capítulo 8 "Which Marker for What Purpose: A Comparison" são comparadas as várias metodologias de marcadores moleculares e a sua capacidade de detectar e quantificar a variação genética, incluindo os custos e os benefícios de cada metodologia.

No último Capítulo os Autores discutem as futuras técnicas, SNPs e análise de microarrays de DNA, expondo os recentes avanços relativos à identificação e detecção de polimorfismos nucleotídicos simples (SNPs) e encarando-os já como os marcadores moleculares da terceira geração.

 

 

Filomena Nóbrega

Investigadora Auxiliar

Estação Florestal Nacional