Abstract

BRAGANCA, Helena; TENREIRO, Rogério  and  SANTOS, Natércia. Identificação de Isolados Portugueses de Armillaria por Testes Clássicos de Confrontação e Análise de RFLP-PCR da Região ITS1 do DNA Ribossomal. Silva Lus. [online]. 2004, vol.12, n.1, pp.67-75. ISSN 0870-6352.

O género Armillaria inclui fungos de espécies muito agressivas que infectam raízes de plantas lenhosas em todas as regiões do globo. A identificação destas espécies tem sido efectuada com base em características morfológicas, em confrontações haplonte-diplonte ("mating-tests") e também em análise de DNA, nomeadamente análise de polimorfismos de restrição de fragmentos amplificados (RFLP-PCR) das regiões espaçadoras (ITSs) dos genes ribossomais (rDNA nuclear). Neste estudo, 20 isolados de uma colecção portuguesa de espécies de Armillaria foram analisados por "mating-tests" e por análise de restrição da região ITS1. Ainda que tenha sido possível identificar 80% dos isolados diplóides através das confrontações haplonte-diplonte, o método é laborioso, demorado (2 meses ou mais) e apresenta uma taxa elevada de resultados não conclusivos. A análise de restrição da região ITS1, com a enzima HinfI, permitiu discriminar claramente a espécie A. mellea (245 bp e 125 bp), uma das mais agressivas, das outras espécies europeias deste género (290 bp e 70 bp).A simplicidade das técnicas moleculares utilizadas, aliada à sua rapidez de execução (1 dia), torna a identificação de A. mellea por análise de ITS1 um método acessível e de grande utilidade em laboratórios de patologia vegetal, nomeadamente os envolvidos no controlo e preservação de florestas.

Keywords : RFLP-PCR; rDNA; Armillaria mellea; plantas lenhosas; sobreiro.

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